Edit
logo2

درباره ما

لورم ایپسوم متن ساختگی با تولید سادگی نامفهوم از صنعت چاپ و با استفاده از طراحان گرافیک است. چاپگرها و متون بلکه روزنامه و مجله در ستون و سطرآنچنان که لازم است و برای شرایط فعلی تکنولوژی مورد نیاز 

با ما تماس بگیرید

غربالگری آبی سفید برای تایید کلونینگ

  • خانه
  • -
  • محصول
  • -
  • غربالگری آبی سفید برای تایید کلونینگ

غربالگری آبی سفید برای تایید کلونینگ

تومان۳۰.۰۰۰

کاربرد: بررسی تک تک کلنی های باکتریایی به منظور تشخیص حضور DNA کلون شده، کاری بسیار زمان بر است. این روش بر پایه تفکیک کلونی های رنگ گرفته به منظور غربالگری سلول های ترانسفورم شده است که دارای وکتور نوترکیب هستند. روش غربالگری آبی- سفید می تواند مفید باشد چرا که زمان و نیروی انسانی کمتری نیاز دارد.
گرچه استفاده از آنتی بیوتیک ها به عنوان نشانگر برای تایید ترانسفورماسیون انجام می گرفت اما در این روش هم سلول هایی که دارای وکتور معمولی بودند و هم سلول هایی که وکتور نوترکیب را دریافت کرده بودند، می توانستند رشد کنند، بنابراین روش اضافی دیگری برای تفکیک بین وکتورهای نوترکیب و وکتورهای غیر نوترکیب نیاز است.

هدف: تایید انجام موفقیت آمیز فرایند ترانسفورماسیون در سیستم های باکتریایی، با استفاده از روش انتخاب آبی-سفید

نوع فایل: pdf

حجم فایل: 955 KB

تعداد صفحات: 9

 

توضیحات

روش غربالگری آبی-سفید چیست ؟

انتخاب آبی- سفید، روشی است که در آن با استفاده از بیان ژن lacZ در باکتری ای کلای، کلونی های باکتریایی دارای پلاسمید حامل DNA خارجی، تشخیص داده می شود. هنگامی که DNA خارجی درون وکتور حضور داشته باشد، بعد از عمل ترانسفورماسیون، دو حالت برای کلونی های باکتری ایجاد می شود؛ کلونی هایی که تنها دارای وکتور هستند و کلونی هایی که دارای وکتور نوترکیب هستند. بررسی تک تک کلنی های باکتریایی به منظور تشخیص حضور DNA مورد نظر در آن ها، کاری بسیار زمان بر است.

روش غربالگری آبی- سفید

بنابراین روش غربالگری آبی- سفید می تواند مفید باشد چرا که زمان و نیروی انسانی کمتری نیاز دارد. این روش بر پایه تفکیک کلونی های رنگ گرفته در صفحات انتخابی است به منظور غربالگری سلول های ترانسفورم شده ای که دارای وکتور نوترکیب هستند. اگرچه استفاده از آنتی بیوتیک ها به عنوان نشانگر برای تایید ترانسفورماسیون انجام می گرفت اما در این روش هم سلول هایی که دارای وکتور معمولی بودند و هم سلول هایی که وکتور نوترکیب را دریافت کرده بودند، می توانستند رشد کنند، بنابراین روش اضافی دیگری برای تفکیک بین وکتورهای نوترکیب و وکتورهای غیر نوترکیب نیاز بود.

بعد از گذشت سال ها که از استرس های آنتی بیوتیک برای تایید باکتری های ترانسفورم شده استفاده می شد، امروزه برای این منظور، از روش انتخاب آبی-سفید استفاده می شود. در روش انتخاب آبی –سفید، DNA به درون جایگاه محدود کننده ژن lacZ کلون می شود. ژن lacZ، آنزیم بتاگالاکتوزیداز را که مسئول تجزیه دی ساکارید لاکتوز به مونوساکاریدهای گالاکتوز و گلوکز است، را کد می کند. بنابراین هنگامی که قطعه ژن خارجی به درون جایگاه محدود کننده lacZ وارد شود، در عملکرد این ژن اختلال ایجاد شده و بنابراین نمی تواند فعالیت خود را انجام دهد.

X-gal آنالوگ لاکتوز است که به صورت ویژه طراحی شده است که هنگام برهمکنش با آنزیم بتا گالاکتوزیداز، تغییر رنگ را موجب شود.

قهرست مطالب:

1. مقدمه
2. واکنش دهنده‌های مورد نیاز و نقش آن‌ها
     X-gal
     IPTG
     آنتی بیوتیک ها
     pBluescript
3. محصول واکنش ترانسفورماسیون
4. روش کار
5. بررسی نتایج
6. مشاهدات
7. حل مشکلات
8. ملاحظات و احتیاط های کار
8. مراحل کار به صورت نمودار

نقد و بررسی‌ها

هیچ دیدگاهی برای این محصول نوشته نشده است.

اولین کسی باشید که دیدگاهی می نویسد “غربالگری آبی سفید برای تایید کلونینگ”

عضویت در
خبرنامه سایت

*** عضویت در خبرنامه سایت

بیوتکر سفیر ترویج زیست فناوری و مرجع دانستی های بیوتکنولوژی. اینجا با هم کلی کتاب و مقاله علمی با موضوعات جذاب می خونیم

بخش های بیوتکر

ساعات کاری ما

شنبه : 10 شب - 8 صبح
یکشنبه : 10 شب - 8 صبح
دوشنبه : 10 شب - 8 صبح
سه شنبه : 10 شب - 8 صبح
چهارشنبه : 10 شب - 8 صبح
پنجشنبه و جمعه : تعطیل

© کپی رایت . تمام حقوق محفوظ است