Edit
logo2

درباره ما

لورم ایپسوم متن ساختگی با تولید سادگی نامفهوم از صنعت چاپ و با استفاده از طراحان گرافیک است. چاپگرها و متون بلکه روزنامه و مجله در ستون و سطرآنچنان که لازم است و برای شرایط فعلی تکنولوژی مورد نیاز 

با ما تماس بگیرید

روش TA کلونینگ – مزیت ها و معایب روش TA کلونینگ

  • خانه
  • -
  • تکنیک آزمایشگاهی
  • -
  • روش TA کلونینگ – مزیت ها و معایب روش TA کلونینگ
روش TA کلونینگ – مزیت ها و معایب روش TA کلونینگ

روش TA کلونینگ :

TA  کلونینگ یک روش ساب کلونینگ است که در آن از آنزیم های محدوالاثر استفاده نمی شود و نسبت به روش معمول کلونینگ سریعتر و ساده تر است. این روش مبتنی بر توانایی بازهای A و T در قطعات مختلف DNA برای هیبرید شدن با یکدیگر است. در این روش قطعه ژنی با استفاده از آنزیم Taq DNA پلیمراز و PCR تکثیر و تولید می شود. این پلیمراز فعالیت تصحیح ‘۳ به ‘۵ ای ندارد و به احتمال زیاد یک ‘۳- آدنین آویزان انتهایی را در هر دو انتهای محصول PCR ایجاد می کند.

آنزیم ترمینال ترانسفراز

در این روش بهتر است که پرایمرهای PCR در انتهای ۵ گوانین داشته باشند زیرا در این حالت Taq پلیمراز با احتمال بیشتری A را در انتهای ۳ قرار می دهد. و کتور هدف نیز با استفاده از آنزیم های محدوالاثر که انتهاهای صاف ایجاد می کنند خطی و سپس به کمک آنزیم ترمینال ترانسفراز به آنها ddTTP اضافه می شود. افزودن وکتور و قطعه مورد نظر در حضور لیگاز باعث جفت شدن A و T های انتهای می شود، شایان ذکر است که امروزه TAکلونینگ وکتورهای تجاری که وکتورهای خطی شده با یک T آویزان انتهایی هستند توسط کمپانی های مختلف تهیه و در دسترس هستند.

مزیت روش TA کلونینگ :

از مزیت های این روش این است که نیازی به اضافه کردن آنزیم های برشی (به غیر از مرحله خطی کردن و کتور) و تهیه پرایمرهای طویل دارای مکان های شناسایی آنزیمهای محدودالاثر نیست.

ایراد روش TA کلونینگ :

اما یکی از معایب این روش این است که جهت قطعه ای که کلون می شود مشخص نیست یعنی ژن هدف ۵۰٪ با جهت معکوس کلون خواهد شد۔

 

نویسنده : سعید کارگر

کانال تلگرامی بیوتکنولوژی

 

ارسال دیدگاه

عضویت در
خبرنامه سایت

*** عضویت در خبرنامه سایت

بیوتکر سفیر ترویج زیست فناوری و مرجع دانستی های بیوتکنولوژی. اینجا با هم کلی کتاب و مقاله علمی با موضوعات جذاب می خونیم

بخش های بیوتکر

ساعات کاری ما

شنبه : 10 شب - 8 صبح
یکشنبه : 10 شب - 8 صبح
دوشنبه : 10 شب - 8 صبح
سه شنبه : 10 شب - 8 صبح
چهارشنبه : 10 شب - 8 صبح
پنجشنبه و جمعه : تعطیل

© کپی رایت . تمام حقوق محفوظ است